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低溫離心機提取RNA酶的10個注意事項

信息來源: 長沙湘銳離心機有限公司     發布時間:2018-11-06    閱讀:

  RNA酶無處不在,在實驗操作的任何一步,任何偶然的疏忽或不妥當的操作都有可能造成RNA酶的污染,從而導致整個實驗的失敗。因此,嚴格控制實驗條件,避免任何可能的污染,是保證實驗成功的關鍵。為此,必須作到以下幾點:

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  1.如果可能,實驗室應專門辟出RNA操作區,湘銳低溫離心機,移液器,試劑等均應專用。RNA操作區應保持清潔,并定期行除菌。

  2.如果可能,在超凈臺中按照細胞培養的要求進行操作,可以有效避免操作中引起的RNA酶污染。

  3.操作過程中應始終戴一次性橡膠手套,并經常更換,以防止手、臂上的細菌和真菌以及人體自身分泌的RNA酶帶到試管或污染用具,盡避免使用一次性塑料手套。塑料手套不但常常造成操作不便,且塑料手套的多出部分常常在器具的RNase污染處和RNase-free處傳遞RNase,擴大污染。

  4.避免在操作中說話聊天。也可以戴口罩以防止引起RNA酶污染。

  5.盡量使用一次性的塑料制品,盡量避免共用器具如濾紙,tips,tubes等,以防交叉污染。例如,從事RNA探針工作的研究者經常使用RNaseH,T1等,在操作過程中極有可能造成移液器、離心機等的污染。而這些污染了的器具是RNA操作的大敵。

  6.關于一次性塑料制品,建議使用廠家供應的出廠前已經滅菌的tips和tubes等。多數廠家供應的無菌塑料制品很少有RNA酶污染,買來后可直接用于RNA操作。許多研究者用DEPC等處理的塑料制品,往往由于二次污染而帶有RNA酶,從而導致實驗失敗。

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  7.配制溶液用的酒精、異丙醇、Tris等應采用未開封的新瓶。

  8.所有舊塑料制品都必須用0.5M的NaOH處理10分鐘,用雙蒸水徹底沖洗,DEPC-H20浸泡過夜后滅菌。

  9.無法用DEPC處理的用具可用氯仿擦拭若干次,這樣通??梢韵齊NA酶的活性。但氯仿會溶解某些塑料制品,應當注意。

  10.RNaseAwayTM試劑可以替代DEPC,操作簡單,價格低,且無毒性。只需將RNaseAwayTM直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸泡后用水沖洗去除,即可以快速去除器皿表面的RNase,并且不會殘留而干擾后繼實驗。

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  如果您需要遠距離運輸或長期儲藏RNA樣品,建議先將標本(細胞、組織)保存在RNA保存液(RNAwait、RNAlater)中,使細胞內的RNA與RNA酶分離,在室溫可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃可以長期存檔保存標本,RNA質量不受影響,用各類方法抽提仍可以獲得高質量的RNA。

  長沙湘銳離心機有限公司位于中國離心機之鄉長沙,公司由3位離心機行業專家共同投資500萬人民幣組建,目前公司專業生產,高速離心機,醫用離心機,臺式離心機,冷凍離心機,低速離心機,全自動脫帽離心機,臺式高速離心機,大容量離心機,美容離心機,石油離心機,制藥離心機。聯系方式:13973153389

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